厌氧菌
一、概念
厌氧菌（Anaerobicbacteia）是一大类不能利用分子氧作为终末电子受体、在大气环境中不能生长、只能在低氧分压和/或低氧化还原电势（Eh）条件下生长的细菌的统称。这类细菌缺乏完整的代谢酶体系，其能量代谢以无氧发酵的方式进行，在无氧条件下比在有氧环境中生长好的细菌，而不能在空气（18%氧气）和（或）10%二氧化碳浓度下的固体培养基表面生长的细菌。它能引起人体不同部位的感染，包括阑尾炎、胆囊炎、中耳炎、口腔感染、心内膜炎、子宫内膜炎、脑脓肿、心肌坏死、骨髓炎、腹膜炎、脓胸、输卵管炎、脓毒性关节炎、肝脓肿、鼻窦炎、肠道手术或创伤后伤口感染、盆腔炎以及菌血症等。
二、分类
根据对O2的耐受程度，可将厌氧菌分为三大类：
（1）对氧极端敏感的厌氧菌：代表菌种为月形单胞菌，这类细菌对厌氧条件要求很高，在0.5%氧分压或暴露空气10min内即死亡，临床上很难分离出。
（2）中度厌氧菌：代表菌种为脆弱拟杆菌、产气荚膜梭菌等临床分离常见的厌氧菌。在2～8％氧分压或暴露空气60～90min仍能分离出。它们在空气中暴露60～90min或在脓汁抽出72h后仍然能分离出来。
（3）耐氧厌氧菌：代表菌种为溶组织梭菌、第三梭菌，这类细菌不能利用氧，在无氧条件下生长好，而在有氧条件下生长不佳。
三、种类
厌氧菌的种类很多，年统计有41个属，近个种。到目前为止，又增加了33个新属，几十个新菌种。
1、按照是否产生芽胞可分为两类:
①芽胞菌（梭菌）：一个菌属，分布于自然界，外源性感染，多以外毒素致病。如破伤风梭菌（破伤风）、产气荚膜杆梭菌（气性坏疽）、肉毒梭菌（食物中毒）和艰难梭菌（伪膜性肠炎）等。
②无芽胞厌氧菌：40多个菌属，分布于人和动物体内，内源性感染，多为条件致病菌。临床最常见的厌氧菌，大多为人体正常菌群的组成成分，部分为条件致病菌。拟杆菌属（最常见，脆弱拟杆菌，条件致病菌）、普雷沃菌属（口腔寄生，牙周感染）、卟啉单胞菌属（牙周、泌尿道感染）、梭杆菌属（口腔、肺部、泌尿道感染）、二氧化碳噬纤维菌属（牙周炎）、纤毛菌属（牙周牙髓感染）、沃廉菌属（牙周牙根感染）、韦荣菌属（口腔、肠道、生殖道正常菌群，牙周牙髓感染）、消化链球菌属（口腔、肠道正常菌群，混合感染）等。
2、按照染色性和形态:革兰阴性厌氧球菌、革兰阴性厌氧杆菌、革兰阳性厌氧球菌、革兰阳性厌氧杆菌。
四、分布
自然界和正常人体中的分布，厌氧菌分布广泛，梭菌属可以以芽胞形式长期存活在自然界中，如破伤风梭菌。绝大多数厌氧菌是寄居在人和动物体内，尤其是皮肤、口腔、胃肠道、呼吸道、泌尿生殖道等处，与需氧菌共同组成人体的正常菌群，参与人体的生长、发育、致病、免疫、衰老、致癌及营养物质的消化吸收，是人体不可缺少的一个系统。
主要厌氧菌的种类在正常人体中的分布情况
五、感染
厌氧菌是人体正常菌群的组成部分，广泛存在于人体皮肤和腔道的深部黏膜表面，在组织缺血、坏死，或者需氧菌感染的情况下，导致局部组织的氧浓度降低，才发生厌氧菌感染。
厌氧菌的感染率很高，约占总感染率的60％以上。菌血症或败血症:10%-20%，肺部厌氧菌:41.1%-84.2%，牙周炎和牙根管炎:96.67%-％。其中一部分感染为单纯厌氧菌感染，但大部分感染是与需氧菌或兼性厌氧菌混合感染(82.23%）。
感染致病原因：
1、组织缺氧或氧化还原电势降低：造成厌氧菌生长繁殖的重要条件。局部组织血液供给障碍：血管损伤、肿瘤压迫、烧伤、动脉硬化、组织水肿、坏死、异物。大面积外伤、刺伤可造成组织氧张力或Eh降低。
2、机体免疫功能下降：接受免疫抑制剂、抗代谢药物、放射治疗、化学药物治疗；长期慢性消耗性疾病（糖尿病、慢性肝炎、肾疾病等）；胃肠道、泌尿生殖道手术；老年人和早产儿。
3、长期使用广谱抗菌素：氨基糖苷类抗生素、头孢菌素等。这两类抗生素对厌氧菌无效，同时破坏了正常菌群内各种微生物种之间相互制约的关系。
4、手术、穿刺术、各种内窥镜检查及侵入性外科技术的发展均可导致细菌寄居部位的改变。
5、细菌间的协同作用：厌氧菌多数情况是与需氧菌、兼性厌氧菌混合感染，表现为一种细菌为另一细菌提供生长发育条件，提供生长因子或养料等。
厌氧菌感染的特点
1、厌氧菌感染可分为外源性感染和内源性感染。除破伤风和气性坏疽等为外源性感染外,其他厌氧菌感染为内源性。厌氧菌感染一般均为内源性感染。
2、厌氧菌感染都具有多菌性混合感染,感染区有气体形成或皮下气体及无消化道穿孔的气腹;分泌物恶臭,约半数以上为厌氧菌感染,分泌物暗红或黑色,经紫外线照射呈红色荧光,为硫磺颗粒。
3、厌氧菌感染的患者,临床上常出现发热、白细胞总数升高及嗜中性粒细胞升高,具有细菌感染的特征,但常规细菌培养时常呈阴性,常用的广谱抗菌药物治疗无效,这是某些感染性疾病迁延不愈和反复发作的重要原因之一。
厌氧菌感染部位主要集中在：头部、胸腔、腹腔、盆腔、泌尿生殖道等。
六、厌氧菌标本采集、送检及培养
1、厌氧菌标本的采集
采集原则：体表及其与外界相通的腔道，即有正常菌群寄生的部位的标本，不宜作厌氧菌检查。
采集方法：针筒穿刺抽取，严格无菌操作，尽量避免接触空气。
采集标本时的要求：
（1）标本绝对不可被正常菌群污染；
（2）尽量缩短与空气接触时间，一般不宜超过30分钟，对氧敏感菌不宜超过10分钟。
2、厌氧菌标本的运送
（1）床边（直接）接种
（2）针筒运送法：主要针对各种液体标本，抽取标本后应排除筒内空气。
（3）无菌小瓶运送法：小瓶内装入厌氧菌液体培养基，除去瓶内氧气。
（4）组织块运送法：将组织块放在厌氧罐内送检。
3、适合或不适合厌氧菌培养的标本类型
适合厌氧菌培养的标本
不适合厌氧菌培养的标本
抽取物（用注射器）、支气管镜保护性毛刷
痰、BALF、气管内抽吸物、气管切口分泌物
鼻窦（抽取）
鼻咽拭子、鼻窦冲洗或拭子不能作为鼻窦炎的病原学诊断
尿液（耻骨上穿刺膀胱尿液）
尿液（排出或从导管导出）
后穹窿穿刺液、输卵管液或组织（抽吸/活检标本）、胎盘
组织（通过剖腹产手术）、宫内节育器（针对放线菌属）、前庭大腺分泌物
会阴拭子、宫颈分泌物、恶露、阴道或外阴分泌物、前列腺液或精液、尿道分泌物
培养艰难梭菌的粪便标本
直肠拭子
血液、骨髓、外科（术中抽取物或组织）
眼部标本（泪道/结膜等结石、房水、前房液（穿刺）、玻
璃体洗液（术中采集）
七、厌氧菌治疗1、切除扩创和引流厌氧菌感染常伴有广泛的组织坏死，必须彻底切除，因坏死组织能降低局部Eh，有利于厌氧菌的繁殖，这是治疗厌氧菌感染的先决条件。产气荚膜杆菌性肌炎（即气性坏疽）时肌肉广泛坏死，也必须切除，严重的甚至需要截肢。坏死性筋膜炎是较少见的厌氧菌感染，筋膜和皮肤常有广泛坏死，如不彻底切除，常难以控制感染的扩散而导致死亡。
2、抗生素疗法抗生素必须选择对厌氧菌敏感的抗生素。厌氧菌对氨基糖甙类抗生素常有抗药性。大多数厌氧菌，除脆弱类杆菌外，均对青霉素G敏感。林可霉素的抗菌谱与青霉素G相仿，如病人对青霉素过敏时可选用。氯霉素几乎对所有的厌氧菌包括脆弱类杆菌在内均有效，但缺点是有骨髓抑制的危险性。厌氧菌对四环素、红霉素和氯霉素的敏感性有差异，且在治疗过程中迅速产生抗药性，氯林可霉素对厌氧菌感染的疗效优于林可霉素，但它和林可霉素一样，有时会引起致命的假膜性结肠炎。在目前的抗菌药中，疗效最好的首推甲硝唑，对所有的厌氧菌包括脆弱类杆菌有效。Sharp等（）发现甲硝唑的疗效优于氯林可霉素和林可霉素，此药价格便宜，即使长期使用也无严重并发症。甲硝唑不仅可口服（mg，每日三次），灌肠（每次1～2g），最近国内已有静脉制剂，0．5%ml，静滴每日2～3次。口服甲硝唑和静脉滴注甲硝唑在结肠手术前准备中的作用，证明这两种方法均能有效地降低伤口的感染率。
3、高压氧法：高压氧能提高组织的氧张力，抑制厌氧菌的繁殖，这一疗法是梭形芽孢杆菌感染治疗中的一个重要方面，但对于无芽孢厌氧菌感染究竟有多少价值，不少人表示怀疑。
4、过氧化氢：是治疗厌氧菌感染伤口的一种有效药物，它所释放的新生氧能杀死厌氧菌。过氧化锌糊剂则可用于治疗某些厌氧菌感染，特别是Meleney溃疡。八、微需/厌氧菌鉴定
目前鉴定厌氧菌/微需氧菌的方法较多，但培养鉴定法始终是可靠性与准确性最高的鉴定方法。目前我们实验室已完全有能力开展对于微需氧/厌氧菌的培养与鉴定，咱们科配有专门的用于厌氧培养的血培养瓶、厌氧袋以及微需氧袋，可以满足临床对于微需氧/厌氧菌的培养。鉴定方面，我们科目前已有比较先进的进口梅里埃的质谱鉴定仪以及专门的用于厌氧菌鉴定的梅里埃鉴定卡，均可以对微需氧/厌氧菌的精确的鉴定，更好地为临床提供更准确地病原学信息。
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